高效液相色谱法测定紫苏子油中的VE中大丰干燥设备气模高尔夫鞋物品包装

高效液相色蒸馏器谱法测定紫苏子油中的α—VE(中)

3结果与讨论

3.1检测波长的选择

将α—VE对照品的流动相溶液，在荧光光度计上进行扫描，根据对实验板（又称实验台）的制造工艺要求很高激发光谱图，激发光最大峰值波长在292nm，而荧光光谱中的荧光峰值波长为325nm。因此荧光检测器的激发波长选择λ=292nm，发射波长选择λ=325nm。

3.2α—VE测定方法的选择

从VE的结构可知，α—VE的苯环上含有三个甲基，β、γ—VE的苯环上均含有两个甲基，但甲基的位置不同，δ—VE的苯环上含有一个甲基。正是由于四种VE结构上的差异，因而产生洗脱顺序的不同。在正相高效液相色谱法测定VE时，首先是α—VE被洗出，其后是β—VE、γ—VE，最后是δ—VE；而在反相高效液相色谱法测定VE时，则正好相反，最先流出的是δ—VE，其后是β—VE和γ—VE，α—V结构容量1般为1000lbE将最后被洗出。正相与反相高效液相色谱法相比，前者四种VE的分离度较好，特别是β、γ两种异构体在正相高效液相色专业油墨谱中能完全分开(见图1和图2)，这对进一步研究天然VE中各种异构体的抗氧性质具有重要意义。因此，本研究采用正相高效液相色谱法测定VE。

图1显示的是α、β、γ和δ四种VE异构体在正相硅胶柱上的HPLC色谱图(流动相：正己烷/异丙醇99.8/0.2，荧光检测器，激发光波长：λex=292nm，发射光波长：λem=325nm)，α、β、γ、和δ四种VE异构体在此条件下可以完全圆钳口标配有：φ6⑴3、φ13⑵6、φ26⑷0分离；图2显示的是α、β、γ和δ四种VE异构体在OD绞车S柱上的反相HPLC色谱图(流动相：甲醇/水，98.5/0.2；紫外测器，λ=292nm)

3.3标准曲线的绘制和线性范围

精密称取α—VE对照品51.2mg，加流动相溶液适量，使其溶解并定容至50mL，精密吸取上述对照品溶液适量，置于25mL容量瓶中，加流动相溶液定容，摇匀，按实验方法2.3所述进行双头螺柱高效液相色谱分析，结果见表1。

线性回归方程为：Y=100.16X－3600.73(r=0.9996)，试验结果表明：α—VE在41.0～1024.0μg/mL范围内线性良好。

3.4精密度试验

将含α—VE浓度为98.0μg/mL左右的样品十份，按照设定的色谱条件进行测定，计算五次进样的色谱峰峰面积和RSD值(结果见表2)。天内RSD值等于2.11，天间RSD值等于3.91。后者RSD值较高主要是受α—VE稳定性的影响。

(待续)